- 2021-2-28抗體純化方法簡介(附示意圖)
制備出效價高,特異性強,穩定性好的抗體是免疫學實驗取得成功的基礎,抗體質量的好壞直接影響著研究者研究的成敗,不同的免疫學實驗方法(如ELISA,IHC,IP,ICC,SDS-PAG ...
- 2020-8-12磷酸化蛋白組學樣本準備指南
蛋白組學是生物研究的重要內容,好的樣品就是實驗成功的首要條件,那么樣品的收集以及預處理便是決定實驗成敗的重要起點。下文總結了多年的樣品前處理經驗,下面給大家簡單介紹一下蛋白質組學各類型樣品都是如 ...
- 2018-11-14包涵體純化與復性的方法簡介與案列介紹
包涵體的純化和復性總結
包涵體折疊復性的方法應具備以下幾個特點:較高的活性蛋白質回收率;復性產物易于與錯誤折疊蛋白質分離;折疊復性后能夠得到較高濃度的蛋白;折疊復性 ... - 2018-11-14包涵體復性注意事項和常見問題解析
包涵體復性注意事項
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最適pH值范圍為8.0-9.0之間;
溫度適宜選擇4℃;
復性時間一般為24- ...
- 2018-11-14包涵體復性常見問題匯總
1.如何盡量避免蛋白表達過程中包涵體的形成? (1). 包涵體的形成很大一部分原因是蛋白表達過快引起的,那么降低誘導溫度,例如25–30°C,或降低IPTG濃度(0.01–0.1mM ...
- 2018-11-14包涵體復性基礎知識
什么是包涵體蛋白? 包涵體是在重組蛋白表達過程中,在細胞(菌體)內通過誘導新合成的肽鏈錯誤折疊,而發生聚集產生的不溶于水、無生物活性的聚集體。特別是在大腸桿菌表達真核細胞蛋白時最為常 ...
- 2018-4-26常用蛋白酶酶切位點及融合標簽去除策略
目前主要通過4種方法移除多肽標簽,即化學法、內切蛋白酶法、外切蛋白酶法以及基于內含肽的自我剪切法。 一、化學法 最常用的便是溴化氰(CNBr)法,原理是C ...
- 2018-1-27 His 標簽純化常見問題|組氨酸標簽蛋白磁珠純化常見問題
1.蛋白不掛磁珠 蛋白不掛磁珠說白了就是蛋白和磁珠的結合能力不足導致的。根據影響結合能力的因素,可按照以下思路來排查原因。 1)His標簽還在嗎?大腸桿菌表達外源蛋白過程 ...
- 2018-1-27用于組氨酸標簽蛋白純化的Ni親和磁珠
1. 組氨酸標簽蛋白 蛋白質表面的一些氨基酸,如組氨酸、色氨酸、半胱氨酸等能與多種金屬離子(Ca2+、Mg2+ ...